长链非编码rna（lncrna）研究-凯发k8网页登录
长链非编码rna(long noncoding rna, lncrna)指的是长度超过200nt的rna分子。它们不编码蛋白，位于细胞核或胞质内，具有保守的二级结构，可与蛋白质、dna和rna相互作用，通过多种机制（如基因印记、染色质重塑、细胞周期调控、剪接调控、mrna降解和翻译调控等）在多种层面上（如表观遗传学、转录调控及转录后调控等）调控基因的表达水平。
lncrna参与多种生物学过程的调控，在多种生命活动中发挥重要作用，该领域的关注度也日益增高，已成为继信使rna(mrna)、小rna(microrna、sirna等)之后功能基因组学最火热的研究领域。
金开瑞现提供下述lncrna研究服务：
1、确定lncrna表达
利用q-pcr技术检测lncrna在不同组织中的表达水平。
2、探究lncrna特点
（1）通过qd-fish原位杂交技术定位；或者通过细胞核质分离试剂盒得到rna，qrt-pcr检测其分布；
（2）全长序列试验方法：通过race得到lncrna完整的全长序列。
3、lncrna的功能研究
lncrna较长，承载的信息量多，更容易形成高级结构，其功能具有多样化和特异性强的特点。类似于mirna，探讨lncrna功能可用 gain/loss of function 策略，过表达或沉默lncrna后观察表型。即研究lncrna功能获得后或者功能缺失后对细胞增殖、凋亡、侵袭、转移与克隆形成，以及病毒的转录复制等的影响。
（1）功能获得性研究
构建lncrna过表达质粒或者慢病毒、腺病毒包装载体。
（2）功能缺失性研究
sirna、shrna、crispr/cas9。
4、检测结合蛋白质
利用体外转录，rna pull down, ms等技术手段检测与rna绑定的蛋白质。
5、预测并验证作用的mirna
利用软件预测mirna在lncrna的作用靶点，并进行验证。
6、表达调控
将lncrna表达与其他领域相结合，解释其调控机理。（1）dna甲基化和乙酰化：可通过检测相应基因甲基化、乙酰化差异与lncrna结合分析。（2）转录因子：研究lncrna与转录因子的调控机制。
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