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第②课开讲啦| 看直播,找答案,打通蛋白研究任督二脉!
文章来源:genecreate 作者:genecreate 发布时间:2020-05-11 09:57
01、讲座时间
2020年5月13日19:30-20:30
02、讲座主题
蛋白质组学和单抗技术在农学课题中的综合运用策略
03、讲师简介
 

詹雷雷
浙江大学生命科学学院博士、博士后
        研究成果接连刊登在nature structural & molecular biology、rna biology、nature communications heredity、genome、 trends evolutionary biology等杂志 上;研究期间获得国家自然科学基金青年项目一项,国家博士后基金两项,浙江省博士后择优资助项目一项。
       目前担任我司研发部学术pi ,主责多个科研合作项目,已协助客户发表论文数十篇,另有多篇文章在审稿和修回中。
 
04、报名方式
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答疑时间
学生疑问:胶体金稳定性一直不太好,放一段时间灵敏度就会降低或者升高,怎么调整?
讲师解答:如果原料各方面没有问题的前提下,结果不稳定,比较常见的原因有这两个:样本前理不当;成品未放置在干燥的环境下保存。
 
学生疑问:呼吸道病原微生物胶体金检测的假阴性如何避免或者降低?
讲师解答:一般情况下,假阴性主要是原料灵敏度不够导致,所以在开发成品之前,除了确保抗体的特异性外,还应大致了解自己的样本待检测范围。
 
学生疑问:蛋白表达在包涵体和上清对抗体制备的影响
讲师解答:抗原在是否能制备高亲和力抗体的过程中占据非常重要的位置,俗话说,抗原制备好了,抗体也就成功了一半,那么什么才叫好的抗原,最简单的理解,即蛋白结构及修饰越接近天然蛋白,蛋白质量就越好,所以大多数客户都更倾向于制备的免疫原能是上清表达的蛋白,但是做过大肠系统表达的都知道,只有30%-40%左右的蛋白能实现上清表达,所以这个时候抗体的筛选方案就非常重要了,当然如果制备的抗体只是做wb等基础的科研实验,包涵体也是可以用的,毕竟它的一级结构是没有问题的。
 
学生疑问:选择蛋白的全长或哪个区段制备抗体,最靠谱的依据是什么呢?
讲师解答:对于抗原的区间选择,没有金标准,不然也就不会有那么多失败的抗体案例了,通常情况下,对蛋白的全长进行一系列分析,比如抗原指数得分,比如亲疏水性,再比如保守区等一系列结构域分析,以及表达情况预测等等,然后再结合后期对抗体的应用需求,预算等等因素,综合选择合适的表达区间,合适的表达系统。
 

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