（clustered regularly interspaced short palindromic repeats）是新出现的一种由sgrna指导cas核酸酶对靶向基因进行特定dna修饰的技术。在这一系统中，sgrna引导序列靶定位点剪切双链dna达到对基因组dna 进行修饰的目的。
　　虽然有很多crispr–cas系统需要多种蛋白的参与，但是在很多细菌的胞内都只需要一种内切酶（endonuclease）——cas9就足够了，我们将这种crispr–cas系统也称作2型系统（type ii systems）。
　　cas9内切酶在向导rna的指引下能够对各种入侵的外源dna分子进行定点切割，不过主要识别的还是保守的间隔相邻基序（proto-spacer adjacent motifs，pam基序）。如果要形成一个有功能的dna切割复合体，还需要另外两个rna分子的帮助，它们就是crispr rna (crrna)和反式作用crispr rna（trans -acting crispr rna, tracrrna)。crrna（ crispr-derived rna ）通过碱基配对与 tracrrna （trans-activating rna ）结合形成 tracrrna/crrna 复合物，此复合物引导核酸酶 cas9 蛋白在与 crrna 配对的序列靶位点剪切双链 dna。不过最近有研究发现，这两种rna可以被“改装”成一个向导rna（single-guide rna, sgrna）。这个sgrna足以帮助cas9内切酶对dna进行定点切割。最新的报道称，在多种类型的细胞和生物体内，这种rna介导的cas9酶切作用能够正常地行使功能，在完整基因组上的特定位点完成切割反应。这样就可以方便地进行后续的基因组改造工作了。
　　细胞通常会通过两种方式对发生双链断裂的dna进行修复，这两种方式分别是同源重组修复机制（homologous recombination, hr）和非同源末端连接修复机制（non-homologous end joining, nhej），不过在修复的过程中细胞有可能会对修复位点进行修饰，或者插入新的遗传信息。
　　为满足不同实验需求，金开瑞现推出crispr/cas9技术服务，可根据您的需要量身定制您专属的crispr/cas9载体，包括pcas9/grna1 载体和pcas9/grna3 载体，并可利用pcas9/grna1或pcas9/grna3 载体进行基因敲除服务。
　　（1）pcas9/grna1 载体可在哺乳动物细胞内同时表达人源化 cas9 蛋白和 grna，只需转染一个质粒就能实现对靶基因的切割。