技术专题
蛋白样品脱盐处理方法比较
文章来源：genecreate
作者：genecreate
发布时间：2019-02-19 17:30
蛋白大分子脱盐要求在样品制备中经常遇到，选择合适的脱盐方法显得非常重要；在蛋白回收率、脱盐效率、蛋白生物活性、操作难易程度、耗时等方面需要综合考虑，找到合适的脱盐方式。
下面对透析法、超滤法、脱盐柱法三种常用的脱盐方式做一个对比分析，为今后选择合适的脱盐方法作为参考。
一、透析法特点：（性价比低）
1.时间长（需要过夜）
2.需要大体积的缓冲液
3.透析袋使用前处理繁琐
4.透析袋可能会破，导致样品丢失，重复使用次数少
5.样品易沉淀失活
6.价格相对低
二、超滤法特点：（性价比一般）
1.时间较长
2.重复使用次数少
3.操作简单
4.蛋白回收率低
5.蛋白易失活
6.价格较高
三、脱盐柱法特点：（性价比高）
1.时间短
2.重复使用次数多
3.操作简单温和不易失活
4.蛋白回收率高
5.价格相对低
脱盐柱法案例
层析柱：1.6cm*20cm中压玻璃层析柱,装填千纯生物pudex g25 medium填料（柱体积40ml）
样品：igg、bsa、lysozyme（各1mg/ml）
上样量：流速为50cm/h时，上样量为3ml（柱体积的7.5%）；流速为100cm/h和150cm/h时，上样量为8ml（柱体积的20%）
下面对透析法、超滤法、脱盐柱法三种常用的脱盐方式做一个对比分析，为今后选择合适的脱盐方法作为参考。
一、透析法特点：（性价比低）
1.时间长（需要过夜）
2.需要大体积的缓冲液
3.透析袋使用前处理繁琐
4.透析袋可能会破，导致样品丢失，重复使用次数少
5.样品易沉淀失活
6.价格相对低
二、超滤法特点：（性价比一般）
1.时间较长
2.重复使用次数少
3.操作简单
4.蛋白回收率低
5.蛋白易失活
6.价格较高
三、脱盐柱法特点：（性价比高）
1.时间短
2.重复使用次数多
3.操作简单温和不易失活
4.蛋白回收率高
5.价格相对低
脱盐柱法案例
层析柱：1.6cm*20cm中压玻璃层析柱,装填千纯生物pudex g25 medium填料（柱体积40ml）
样品：igg、bsa、lysozyme（各1mg/ml）
上样量：流速为50cm/h时，上样量为3ml（柱体积的7.5%）；流速为100cm/h和150cm/h时，上样量为8ml（柱体积的20%）
| 流速(cm/h) | 蛋白峰(ml) | 半峰宽(ml) | 盐峰(ml) | 半峰宽(ml) | rs |
| 50 | 15.21 | 3.29 | 30.67 | 5.3 | 1.7998 |
| 100 | 19.21 | 7.7 | 33.33 | 8.78 | 0.86 |
| 150 | 18.56 | 8.42 | 34.09 | 8.82 | 0.9 |
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