pfu ⅱ高保真dna聚合酶

pfu ⅱ高保真dna聚合酶 -凯发k8网页登录

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产品编号 规格 数量
jkr-dem043

产品说明

pfu ⅱ高保真dna聚合酶能与持续能力增强结构域融合,增加了保真度和速度,可作为独立的酶或以主混合物的形式提供,能够对各种模板进行高特异性扩增;是克隆的理想选择,可用于长的或困难的扩增子。与其他 dna 聚合酶相比,pfu ⅱ高保真dna聚合酶性能稳定,实验方案耗时少,能以更低的酶量实现更高的产出。

 

 

产品介绍
capfu ⅱ dna polymerase是基于pfu ⅱ dna polymerasee经基因⼯程改造⽽成。在⼤肠杆菌中重组表达得到的⾼度热稳定的dna聚合酶,与持续能⼒增强结构域融合,具有较⾼的扩增效率和保真性,⽤于扩增困难模板的扩增。扩增效率可以到达1kb/10s的速度,同时具有很强的长片扩增能力。

 


产品特点
高纯度:纯度>95%,无核酸酶残留,宿主gdna残留量低;
保真性好:相比taq dna polymerase具有更高的保真性;
灵敏度高:经过改造提升了模板亲和力,提高了低浓度模板的检测灵敏度;
扩增片段长:可扩增长度达10kb的λ-dna目的片段;

 


产品应用
长片段pcr扩增
dna片段的克隆

 


产品数据
 1、sds-page电泳图

图1. csb-dem043 pfu ⅱ dna polymerase sds-page电泳图

2、不同模板浓度扩增效果

m:trans2k dna marker,nc:阴性对照。
图2. csb-dem043 pfu ⅱ dna polymerase扩增λ-dna 1kb片段,不同模板量(100ng-1pg)均可有效扩增出目的片段,灵敏度低至1pg。

 3、与竞品酶对比测试

line 1-6:pfu ⅱ dna polymerase,λ-dna 1/2/4/6/8/10kb
 line 7-12:品牌n pfu ⅱ dna聚合酶,λ-dna 1/2/4/6/8/10kb
m:trans15k dna marker 
图3. csb-dem043 pfu ⅱ dna polymerase 扩增λ-dna 1-10kb片段,对比某品牌 pfu ⅱ dna聚合酶

产品组分

产品参数

操作说明

【注】:a.引物浓度:一般来说反应体系中引物终浓度为0.2um即可得到较好的效果。反应性能较差时,可在终浓度0.1um-1.0um范围内调整引物浓度。

b.模板浓度:动植物基因组dna 0.11ug,大肠杆菌基因组dna 10100 ng,λdna 0.110 ng,质粒dna 0.110 ng。如模板为未稀释cdna原液,使用体积不应超过qpcr反应总体积的1/10

c.聚合酶浓度酶量可在0.25 - 1ul之间调整。通常情况下加大酶量可以提高扩增产量,但有可能会使特异性下降。

d.mg2  和添加剂:大部分pcr反应体系中的mg2 浓度应在1.05.0 mm范围之内,但对于一些扩增困难的样本,例如高gcdna样本,可能需要在pcr反应体系中加入添加剂,例如dmso或甲酰胺等。

 

【注】:e.退火温度和时间:退火温度需要根据引物的 tm 值进行调整,一般设置成低于引物tm值3~5℃即可。推荐退火时间设置为 20 sec,可以在 10-30 sec 内调节。



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